ACK紅細胞裂解液是一種廣泛用于生物學和免疫學研究中的試劑。主要用于從血液樣本中去除紅細胞,從而獲得純化的白細胞、淋巴細胞或其他類型的細胞。這對于細胞免疫學、流式細胞術、分子生物學等實驗中非常重要,因為它能夠幫助研究人員獲得高質量的細胞群體用于后續的分析。

1.滲透壓差異:氯化銨的加入改變了紅細胞外部液體的離子濃度,從而導致紅細胞內外的滲透壓不平衡。紅細胞膜對滲透壓的變化較為敏感,因此,當外部滲透壓迅速變化時,細胞膜會被拉伸、膨脹,最終導致破裂。
2.膨脹與破裂:紅細胞因滲透壓的變化而吸水膨脹,直至其膜無法承受內外壓力差異,最終發生破裂。此時,紅細胞內的成分,如血紅蛋白(Hb)等,釋放到液體中。
3.白細胞的保護作用:能夠選擇性地溶解紅細胞,而對白細胞、淋巴細胞等其他類型的細胞影響較小,因此可以保留并分離白細胞群體。這是其廣泛應用于流式細胞術和免疫學研究的基礎。
優點:
1.高效溶解紅細胞:
能夠快速且高效地溶解紅細胞,通常在幾分鐘內就能完成紅細胞的裂解過程,顯著提高實驗效率。
2.保留白細胞:
ACK裂解液的配方設計可以確保紅細胞的快速破裂而不損傷白細胞,因此非常適合用于白細胞分離和純化。
3.易于使用:
ACK裂解液一般可以直接使用,且其配方簡單、操作容易,是研究人員實驗中常用的標準試劑。
4.適用于多種實驗:
無論是在流式細胞術、細胞分選、免疫學研究還是血液學分析中,都表現出了良好的適應性,是許多實驗中不可少的試劑。
ACK紅細胞裂解液的使用方法:
1.樣本預處理:
從外周血或其他組織來源獲取樣本后,將其與裂解液按一定比例混合。常用的比例為1:1或1:2(血液體積與裂解液體積的比例),但具體比例需要根據實驗需求調整。
2.裂解過程:
混合后,輕輕顛倒試管,使樣本與裂解液均勻混合。通常,紅細胞會在1-5分鐘內破裂。裂解后的樣本可以通過離心去除碎片,收集上清液中的細胞進行后續分析。
3.細胞洗滌:
裂解后,通常需要通過離心洗滌細胞,以去除多余的裂解液和血漿成分。細胞洗滌后可用于流式細胞術或其他實驗。
4.注意事項:
在操作時,需要注意溫度和時間的控制,以避免過度溶解白細胞或損傷細胞功能。一般情況下,ACK裂解液的使用時間不宜過長,以防止白細胞的死亡。